AXL抑制剂使表达AXL的细胞对奥西替尼敏感

　　AXL抑制剂是否可以增加EGFR突变的NSCLC细胞对EGFR-TKIs的敏感性。AXL抑制剂NPS1034对EGFR突变的NSCLC细胞系的生存能力没有影响。NSP1034与第三代EGFR-TKI 奥西替尼或rociletinib联合使用72小时，可增加细胞对这些EGFR-TKIs的敏感性，并降低高AXL表达的PC-9、PC-9GXR和HCC4011细胞的存活率，我们证明AXL是NPS1034的抑制靶点，使EGFR突变的NSCLC细胞对奥西替尼敏感。

　　奥西替尼联合干扰RNA或 AXL抑制剂NPS1034 在1 小时或72 小时后同样显著抑制了AXL,EGFR,HER3,和AKTD的磷酸化，相比于仅奥西替尼治疗高AXL表达的细胞系。相比之下，低AXL表达细胞系，奥西替尼和NPS1034没有影响AKT蛋白激酶的磷酸化，相比于奥西替尼单药。另一种AXL抑制剂(ASP2215)与奥西替尼联合使用72小时对PC-9和HCC4011细胞也产生了相似的作用相比于单独使用奥西替尼。

　　这些结果清楚地表明，联合使用AXL抑制剂可以增加细胞对奥西替尼的敏感性，主要通过调节AKT活性，从而降低高表达EGFR的非小细胞肺癌细胞系的生存能力。

　　AXL抑制剂阻止了超耐药细胞的出现

　　超耐药(DT)细胞被定义为对靶向药物敏感性显著降低（100倍）的一小群细胞。它们是在接触靶向药物的几天到几周内产生的。由于细胞获得了耐药性，DT细胞被认为是肿瘤复发的基础。因此，我们检测了AXL是否参与了暴露于奥西替尼的DT细胞的出现。先前的一项研究表明，来自暴露于厄洛替尼的PC-9细胞的DT细胞通过IGF-1R（胰岛素生长因子1受体）信号保持其活力。我们发现与亲代PC-9细胞相比，奥西替尼耐药的DT细胞IGF-1R蛋白的表达和磷酸化水平更高。此外，与亲代细胞相比，DT细胞表达了更高水平的EGFR、HER3和AXL.有趣的是，虽然AXL磷酸化增加，但与亲代细胞相比，DT细胞中EGFR和HER3的磷酸化减少，这表明了AXL和IGF-1R的依赖关系。事实上，与亲代细胞相比，DT细胞中与EGFR和HER3相关的AXL蛋白更多。AXL抑制剂(NPS1034)和IGF-1R抑制剂(OSI906)均可明显降低DT细胞的生存能力，而亲代PC-9或HCC4011细胞则无明显降低。NPS1034和OSI906对DT细胞的联合治疗进一步抑制了DT细胞生存能力。免疫印迹分析显示，奥西替尼不能抑制DT细胞的EGFR,HER3,ERK,AXL的磷酸化，NSP1034治疗抑制了AXL,EGFR和HER3的磷酸化从而抑制AKT蛋白激酶的磷酸化，但并不影响的ERK磷酸化。此外，使用奥西替尼联合NPS1034对PC-9、PC-9GXR和HCC4011细胞进行连续治疗，阻止了DT细胞的出现。这些结果表明，除了IGF-1R外，AXL还在奥西替尼的DT细胞出现过程中发挥了关键作用。

更多详情请访问 奥西替尼 https://azd9291.kangbixing.com/